卫生部药理临床研究基地 福建省临床研究中心
（一）痛血康胶囊、保险子胶囊单用和合用的镇痛作用
1、热板法测痛
选用小白鼠，热板法测痛反应匣在温度55±0.5℃水浴箱内，以小鼠舔后足作为痛反应指标，以给药后痛阈值变化反映药物的镇痛效应，见表2-1和表2-2。
表2-1 小鼠热板法的痛阈值提高作用
| 组别 |
动物数
(只) |
剂量及途径
(g/kg) |
痛阈值(X±SD)(秒)
给药前 |
痛阈值(X±SD)(秒)
给药后 |
延长率
(%) |
P值 |
| 1%阿拉伯胶 |
10 |
20ml |
18.4±2.6 |
19.3±1.9 |
4.8 |
>0.05 |
| 痛血康胶囊 |
10 |
1.0ig |
18.0±1.8 |
28.4±8.8 |
57.8 |
<0.01 |
| 保险子 |
10 |
0.15ig |
18.3±2.2 |
23.0±4.5 |
25.7 |
<0.05 |
| 痛血康胶囊 |
|
1.0ig |
|
|
|
|
| + |
10 |
+ |
20.2±2.3 |
33.2±12.9 |
64.4 |
<0.01 |
| 保险子 |
|
0.15ig |
|
|
|
|
| 痛血康胶囊 |
10 |
2.0ig |
18.3±3.0 |
33.3±9.2 |
82.0 |
<0.01 |
| 保险子 |
10 |
0.3ig |
18.0±2.4 |
29.9±12.2 |
66.1 |
<0.01 |
| 痛血康胶囊 |
|
2.0ig |
|
|
|
|
| + |
10 |
+ |
17.7±1.8 |
49.7±13.4 |
180 |
<0.01 |
| 保险子 |
|
0.3ig |
|
|
|
|
| 盐酸吗啡 |
10 |
0.01ig |
18.2±2.5 |
52.3±11.5 |
187 |
<0.01 |
结果表明痛血康胶囊和保险子对小鼠热痛刺激有明显的抑制作用，两药合用效果显著增强，痛血康胶囊2g/kg+保险子0.3g/kg合用与盐酸吗啡0.01g/kg.ip作用相当。
表2-2 小鼠热板法的镇痛效应
| 组别 |
动物数
(只) |
剂量(g/kg)
途径 |
痛阈值(X±SD)(秒)
给药前 |
给药后
(延长率)%
30' |
给药后
(延长率)%
60' |
给药后
(延长率)%
90' |
| 痛血康 |
10
10
12
|
2.5ig
3.0ig
0.20sc
|
9.4±2.2
10.9±2.7
10.7±2.6
|
22.6±15.7**
(140)
17.1±10.5**
(57)
35.9±17.8**
(236) |
23.2±12.4**
(147)
25.5±16.6**
(134)
43.9±18.6**
(310) |
29.2±18.8**
(211)
39.9±16.3
(266)
45.1±19.8**
(321) |
| 保险子 |
10
10
|
0.20ig
0.20sc
|
10.4±2.7
10.0±2.3
|
20.0±5.8**
(92)
31.1±21.1**
(211) |
25.1±13.4**
(141)
40.1±25.0**
(301) |
33.5±17.9**
(222)
26.9±19.2**
(169) |
| 盐酸吗啡 |
12
|
0.02ip
|
11.6±2.1
|
51.2±11.3**
(341) |
33.1±17.2**
(185) |
21.8±14.5**
(88) |
注：与给药前比较 *P<0.05
**P<0.01
结果表明，痛血康胶囊镇痛起效较吗啡和保险子慢，其痛阈值在60-90分钟内可趋近于吗啡在30分钟时的痛阈值。吗啡痛阈值在30分钟后急剧衰退，痛血康则能保持高水平痛阈值2.5-3个小时，在服药后7个小时内仍具有较高痛阈值。
2、抑制扭体反应
实验用小白鼠，分组，每鼠腹腔注射1%醋酸0.3ml，引起扭体反应，注射醋酸5分钟后，开始记录10分钟内小白鼠扭体次数。给药组预先1小时(ig)或45分钟(sc)前给药，结果见表
表2-3 对小鼠扭体反应的抑制作用
| 组别 |
动物数
(只) |
剂量(g/kg)
(途径) |
扭体次数
（次/10分）
X±SD |
抑制率
(%) |
P |
| 1%阿拉伯胶 |
20 |
20ml |
36±8 |
|
|
| 痛血康 |
11
10
12
12 |
1.50ig
3.00ig
0.10sc
0.20sc |
10±7
2±3
14±8
8±8 |
70
93
60
77 |
<0.01(<0.05△)
<0.01
<0.01
<0.01 |
| 云南白药 |
12
10 |
3.00ig
0.3sc |
24±3
19±9 |
32
45 |
<0.01
<0.01 |
| 盐酸哌替啶 |
12 |
0.01ig |
13±9 |
63 |
<0.01 |
结果表明痛血康ig和sc对小鼠扭体反应均有明显抑制作用，作用强度较同剂量的云南白药明显强（p<0.05与△云南白药比较）。
3、甲醛致痛法测试
实验用小白鼠，分组，ig给药1小时后右后足背sc2.50%，甲醛0.03ml，记录15min内舔后足次数，结果见表
表2-4 对甲醛致痛反应的抑制作用
| 组别 |
动物数
(只) |
剂量
(g/kg) |
舔足次数
(X±SD15min) |
抑制率
(%) |
P值 |
| 阴性对照组 |
10 |
N.S.10ml |
15±4.8 |
|
|
| 痛血康 |
2.0
3.0 |
9±2.4
7±2.9 |
9±2.4
7±2.9 |
40
51 |
<0.01
<0.01 |
| 度冷丁 |
10 |
0.20(ip) |
4±0.8 |
69 |
<0.01 |
结果表明痛血康灌胃给药有明显抑制甲醛致痛反应，效应与剂量相关。
（二）止血作用试验
1、对体外创伤性出血的止血作用
（1）兔股动脉止血作用
根据常规实验方法制作家兔股动脉创伤性出血模型。对出血家兔分别给予痛血康胶囊、云南白药、淀粉三种药物按拉丁方程序敷药，止血效果按倒数记分法记分，用方差分析和药物间两两比较进行显著性测定，方差分析结果表明，痛血康胶囊和云南白药均有显著的止血效果（p<0.01）。
（2）对兔肝脏止血作用
依常规实验方法制作家兔肝脏创伤性出血模型。
对出血家兔分别给予受试药粉，实验结果表明：痛血康胶囊和云南白药对兔肝脏创伤出血有明显的止血作用（p<0.01）。
2、对小鼠断尾出血的止血作用
依常规实验方法给予断尾小鼠受试药粉测定结果见表2-5。
表2-5 对小鼠断尾出血的止血作用
| 组别 |
动物数 |
剂量(g/kg)
给药途径 |
出血时间
(X±SD分) |
出血时缩短
百分率% |
P值 |
| 1%阿拉伯胶 |
12 |
10ig |
8.2±2.8 |
|
|
| 痛血康胶囊 |
10
10 |
2.0ig
0.2sc |
2.0±1.5
4.8±2.6 |
75.3
42.1 |
<0.01
<0.01 |
| 云南白药 |
10
12 |
5.0ig
2.0sc |
4.4±2.8
2.0±3.6 |
46.9
74.8 |
<0.01
<0.01 |
结果表明，痛血康胶囊灌胃和Sc给药，均有明显的缩短出血时间的作用，作用强度与剂量相关且比云南白药效果更显著。
3、缩短凝血时间
根据常规实验方法进行家兔和小白鼠凝血时间测定，比较给药前后的凝血时间。结果表明，痛血康胶囊灌胃给药能非常显著缩短家兔和小鼠凝血时间（p<0.001）。
4、对病理性出血的作用
（1）对抗肝素的抗凝作用
实验用小白鼠分组灌药给药1小时后，尾静脉注射肝素，采血后用玻片法测定凝血时间。
表2-6 对抗肝素的出血作用
| 组别 |
动物数(只) |
剂量(g/kg) |
凝血时间
(X±SD)min |
P值 |
| 对照组 |
10 |
N.S.10ml |
19.1±5.6 |
|
| 痛血康 |
10
10 |
3.0
3.0 |
1.9±0.9△
3.5±2.1 |
<0.001
<0.001 |
| 云南白药 |
10 |
4.0 |
4.5±2.2 |
<0.001 |
注：△与云南白药4g/kg组比较
结果表明，痛血康灌胃给药能显著对抗肝素的抗凝作用，作用强度与剂量相关，痛血康3g/kg组作用比云南白药4g/kg强1.4倍（p<0.01）。
（2）对抗华法令的抗凝作用
结果也表明，痛血康灌胃给药能明显对华法令的抗凝作用，强度与剂量相关，痛血康3g/kg剂量组作用比云南白药4g/kg组强（p<0.01）。
（1）+（2）结论，痛血康对肝素和华法令引起的病理性出血有非常显著的拮抗作用，说明药物的促凝血作用和机制较广泛。
（三）抗炎、消肿、祛瘀、解热作用
1、对巴豆油诱发小鼠耳廊肿胀的抑制作用
以巴豆油为致炎剂涂于小鼠耳朵前后两面，使其肿胀，给药组预先60分钟(ig)或45分钟(sc)前给药，依常规方法测定其抗炎作用，见表2-7。
表2-7 对小鼠耳廊的抗炎作用
| 组别 |
动物数
（只） |
剂量(g/kg)
途径 |
肿胀度(X±SD)mg
给药组 |
肿胀度(X±SD)mg
对照组 |
抑制率
（%） |
P值 |
| 1%阿拉伯胶 |
20
20 |
20ml ig
20ml sc |
|
29.6±7.9
32.1±5.5 |
|
|
| 痛血康 |
12
12 |
3.00ig
0.20sc |
16.7±6.8
3.1±3.0 |
29.6±7.9
32.1±5.5 |
43.6
90.3 |
<0.01
<0.01 |
| 云南白药 |
12
12 |
6.00ig
2.00sc |
6.00ig
2.00sc |
19.9±6.7
32.1±5.5 |
32.8
77.3 |
<0.01
<0.01 |
| 氢化可的松 |
12 |
0.05ip |
10.0±4.3 |
32.1±5.5 |
68.9 |
<0.01 |
结果表明，痛血康ig和sc均有明显抗炎作用，其用药量仅为云南白药的1/4-1/10。
2、痛血康胶囊明显抑制醋酸引起小鼠腹腔血管通透性增加，而且其作用比云南白药明显强(p<0.01)
3、对小鼠慢性肉芽肿的抑制作用
结果表明痛血康灌胃给药对滤纸片植入引起的慢性肉芽肿有明显抑制作用，高、中剂量组的抑制强度与氢化可的松25mg/kg
sc组相当。
4、对豚鼠局部创伤性瘀斑的消退作用
结果表明痛血康ig加局敷能促进创伤性瘀斑的消退。而且药用迅速，用药量小仅为云南白药1/2。
5、解热作用
家兔静脉注射伤寒、副伤寒甲、乙三联菌制作家兔发热模型，对家兔分别给予痛血康胶囊(3g/kg.ig)(2g/kg.ig)、阿司匹林(1.5g/kg.ig)、保险子(0.3g/kg.ig)。结果显示三种剂量的痛血康胶囊和保险子对发热家兔均有解热作用，作用强呈剂量依赖性，起效时间较阿司匹林略长，作用强度则略大，持效时间较阿司匹林显著长。
（四）毒理学研究
1、急性毒性试验（与云南白药比较）
经实验，LD50测定的结果如下：
| 痛血康胶囊(ig) |
LD50 |
11.36g/kg.L95 |
10.55->12.16g/kg |
| 痛血康胶囊(ip) |
LD50 |
0.792g/kg.L95 |
0.718->0.886g/kg |
| 痛血康胶囊(sc) |
LD50 |
0.841g/kg.L95 |
0.785->0.898g/kg |
| 云南白药(ig) |
LD50 |
12.2g/kg.L95 |
11.294->13.108g/kg |
| 痛血康胶囊保险子(ig) |
LD50 |
0.899g/kg.L95 |
0.850->0.950g/kg |
| 痛血康胶囊保险子(sc) |
LD50 |
0.777g/kg.L95 |
0.656->0.899g/kg |
| 云南白药保险子(ig) |
LD50 |
0.909g/kg.L95 |
0.776->1.041g/kg |
2、长期毒性试验
实验结果表明痛血康胶囊高剂量组用量相当于临床人应用剂量的166倍，连续给药2个半月，除消化道恶心反应（几乎全组动物均有），个别动物拉稀便，体重增加较慢外，无严重的不良反应和脏器实质性病变，说明痛血康胶囊具有较大的安全性。
（五）结论
痛血康胶囊具有显著镇痛，促凝止血、抗炎、消肿、解热等作用，与云南白药相比较作用更迅速、药效更强、用药量更小，而测定两药的半数致死量（LD50）相近。提示痛血康有较大的安全范围，广泛的临床适应性。 |