Ⅱ期临床试验摘要
蕲蛇酶注射液含有从蕲蛇毒中分离获得的三个类凝血酶同功酶。临床前实验证明，本品具有抗血小板聚集、降低血浆纤维蛋白原含量，延长部分凝血活酶时间，对抗动物实验性脑血栓及动静脉血栓的效应。毒副反应小。为考察本品对急性脑梗塞的治疗效果及不良反应，经卫生部药政局批准由北京医科大学第一医院神经内科任组长单位，进行Ⅱ期临床试验。参加单位有北京医科大学第三医院、北京友谊医院、福建医科大学附属第一医院及福建省立医院。
一、Ⅱ期临床试验研究方法
1．试验设计
Ⅱ期临床试验分两阶段进行。第一阶段进行随机双盲安慰剂对照试验。第二阶段进行开放试验。由北医大一院、北医大三院、北京友谊医院、福建医科大学附属第一医院、福建省立医
院、北医大一院共同承担。试验结束后，各参试单位分别写出临床试验小结。由组长单位汇集
各单位原始资料与小结材料，作数据整理与统计处理，并进行总结。
2．试验药品与给药方法
试验药：蕲蛇酶注射液lml：0.75U(110μ)支
对照药：注射用水lml/只
以上两种药物均为针剂，大小、颜色、外观完全相同，药品及随机号均由药厂提供，医生按顺序给药。
给药方法：试验药或对照药lml溶于250—500mi生理盐水中静脉点滴(3h以上滴完)，以后继续用维脑路通200mg溶于5%葡萄糖盐水500ml(如为轻型糖尿病者一律用生理盐水)中静脉点滴，每日一次，7天为一疗程。停药5天后开始第二疗程。
给药前一律进行皮试，皮试方法，见附件1。
试验期间禁用其他抗血小板聚集和降低血浆粘度的中西药物，如阿斯匹林、潘生丁、丹参、川芎等，禁用激素、针灸、按摩。
3．试验方法
受试者在接受临床试验前一律进行如下检查：
(1)一般性体格检查，如血压、脉搏、心率、呼吸及一般内科检查。
(2)神经系统检查，包括颅神经、感觉、运动、反射及语言情况。然后进行临床神经功能缺损程度评分(按全国脑血管病扬州会议标准)，并按扬州会议标准分为轻型(0—15分)，中型(16—30分)、重型(31--45分)三组。
(3)头颅CT(或MRl)
(4)血尿便常规、空腹血糖、Bun、Cr、ALT、AST、血脂(胆固醇、甘油三酯)、心电图。
(5)凝血功能检查：包括血小板聚集率、血浆粘度、血球压积、纤维蛋白原、凝血酶原时间，凝血酶原活动度。
(6)血小板计数。
以上(1)(2)(3)项均于第一疗程、第二疗程结束(停药3天之内)再进行检查，(4)(5)项于第二疗程结束(3天之内)进行一次检查。(3)项如有可能治疗结束后再查一次，如病情有恶化，必须复查。(6)项在第一、二疗程开始前和结束后各作一次(共4次)、血小板聚集率如有可能于第一疗程结束再作一次(即共3次)。
4．不良反应
在试验过程中，如实记录各种不良反应及其出现时间，严重程度及处置方法、效果。
5．疗效判定标准
(1)临床疗效评定按扬州会议评分法(见附件2)将用药第一、第二疗程结束后神经功能缺损的总积分，进行自身对比，最后和对照组对比。
(2)按扬州会议规定的基本痊愈、显著进步、进步、无效、恶化的标准(详见附件3)，进行各自的有效率统计及两种有效率比较。
6．临床资料统计处理
采用配对t检验及两组t检验、秩和检验等相应的统计学检验法，进行临床资料统计处理。
二、第一阶段——双盲对照试验
1．一般资料
蕲蛇酶Ⅱ期临床试验第一阶段共200例，试验组、对照组各100例。男性126例(63.0)、女性74例(37.0%)、平均年龄63.64±8.51岁。轻型90例(45.0%)、中型86例(43.0%)、重型24例(12.0%)。用药前病情进展者72例(36.0%)、停顿116例(58.0%)已好转12例(6.0%)。平均既往史评分5.80±3.31分，平均并发症评分5.24+4.67分。
2．病例完成情况，详见表1。
表1 各医院完成病例一览表
| 单位 |
双盲对照试验 |
开放试验 |
总计 |
| 北医大一院 |
85 |
73 |
158 |
| 北医大三院 |
17 |
39 |
56 |
| 北京友谊医院 |
39 |
35 |
74 |
| 福建医科大学附一院 |
30 |
32 |
62 |
| 福建省立医院 |
29 |
30 |
59 |
| 总计(例) |
200 |
209 |
409 |
注：(1)北京医大三院、友谊医院各l例不符合标准，分析时予以剔除
(2)福建医科大学附一院有4例为I期临床验证病例(应用蕲蛇酶0．75U者)
3．试验组与对照组一般情况比较，见表2、表3
表2 两组性别、病情、分型的比较
| |
|
试验组(100例)
n |
试验组(100例)
% |
对照组(100例)
n |
对照组(100例)
% |
P |
| 性别 |
男
女 |
63
37 |
63
37 |
63
37 |
63
37 |
>0.05 |
| 病情 |
进展
停顿
好转 |
34
61
5 |
34
61
5 |
38
55
7 |
38
55
7 |
>0.05 |
| 分型 |
轻
中
重 |
40
46
14 |
40
46
14 |
50
40
10 |
50
40
10 |
>0.05 |
卡方检验
表3 两组年龄、既往史、并发症的比较
| |
试验组
X±S |
对照组
X±S |
p |
| 年龄 |
60．32±0．796 |
63．97±0．907 |
>0．05 |
| 即往史 |
5．740±0．291 |
5．860±0．367 |
>0，05 |
| 并发症 |
5．140±0．351 |
5．330±0．457 |
>0．05 |
t检验
表2、3显示：两组年龄、性别、既往史、并发症、病情、分型均无显著性差异，P>0．05
4．结果及其分析
(1)试验组、对照组各自的疗效
1．1试验组的疗效
表4 试验组治疗前后的比较
| |
|
n |
治疗前
X±s |
治疗前
x±s |
p |
神经功能缺
损程度积分 |
一疗程
两疗程 |
100
97 |
15．210±0．975
15．361±0．990 |
10．320±0．932
7．454±0．834 |
<0．05
<0．05 |
生活能力
状态评级 |
一疗程
两疗程 |
100
98 |
3．790±0．170
3．786±0．171 |
2．860±0．171
2．122±0．164 |
<0．05
<0．05 |
血小板聚集率
血浆粘度
血球压积
纤维蛋白原
凝血酶原时间
胆固醇
甘油三酯 |
|
77
88
93
92
71
94
94 |
36．309±2．425
2．127±0．148
44．514±0．627
2．879±0．187
14，070±0．441
5．324±0．145
1．877±0．132 |
32．60±32．131
2．162±0．136
42．682±0．740
2．548±0．174
13．380±0．284
4．979±0．126
1．867±0．130 |
<0．05
>0．05
<0．05
<0．05
>0．05
<0．05
>0．05 |
配对t检验
表5 试验组一、两疗程治疗后的有效率
| |
一疗程
n |
一疗程
% |
两疗程
n |
两疗程
% |
| 基本痊愈 |
11 |
11.0 |
23 |
23.7 |
| 显著进步 |
26 |
26.0 |
50 |
51.6 |
| 进 步 |
30 |
30.0 |
19 |
19.6 |
| 无 效 |
32 |
32.0 |
5 |
5.2 |
| 恶 化 |
1 |
1.0 |
0 |
0 |
表4显示：试验组临床神经功能缺损程度及生活能力状态，一疗程、两疗程治疗后均比治疗前好转，P<0.05，有显著性差异，试验组的血小板聚集率、血球压积、纤维蛋白原、胆固醇治疗后比治疗前降低，P<0.05，有显著性差异。而血浆粘度、凝血酶原时间、甘油三酯治疗前后无变化，P>0.05。对照组的疗效，见表6、7。
表6 对照组治疗前后的比较
| |
|
n |
治疗前
X±s |
治疗前
X±s |
p |
神经功能缺
损程度积分 |
一疗程
两疗程 |
100
93 |
14．590±1．045
14．527±1．109 |
11．160±1．051
8．591±0．943 |
<0．05
<0．05 |
生活能力
状态评级 |
一疗程
两疗程 |
100
93 |
3．480±0．177
3．430±0．186 |
2．790±0．187
2．323±0．189 |
<0．05
<0．05 |
血小板聚集率
血浆粘度
血球压积
纤维蛋白原
凝血酶原时间
胆固醇
甘油三酯 |
|
80
85
90
86
71
90
88 |
37．519±2．212
2．069±0．168
44．388±0．985
3．179±0．233
13．268±0．246
5．116±0．143
1．566±0．089 |
35．710±1．982
2．175±0．175
4．916±0．069
3．429±0．233
13．352±0．263
49．160±0．142
1．621±0．109 |
>0．05
>0．05
>0．05
>0．05
>0．05
<0．05
>0．05 |
配对t检验
表7 组一、两疗程治疗后的有效率
| |
一疗程
n |
一疗程
% |
两疗程
n |
两疗程
% |
| 基本痊愈 |
10 |
10.1 |
21 |
23.9 |
| 显著进步 |
28 |
28.3 |
23 |
26.1 |
| 进 步 |
20 |
20.2 |
26 |
29.5 |
| 无 效 |
39 |
39.4 |
16 |
18.2 |
| 恶 化 |
2 |
2.0 |
2 |
2.3 |
表6显示：对照组的临床神经功能缺损程度及生活能力状态，一疗程，两疗程治疗后均比治疗前有好转，P<0．05，有显著性差异。而血小板聚集率，血浆粘度、血球压积、纤维蛋白原、凝血酶原时间、甘油三酯治疗前后均无变化，P>0．05。胆固醇治疗后比治疗前有下降，P<0．05，有显著性差异。
1．2 试验组、对照组疗效的比较
表8 两组的疗效及有关化验比较
| 差值 |
|
试验组
n |
试验组
M |
试验组
Q |
对照组
n |
对照组
M |
对照组
Q |
P |
神经功能缺
损程度积分 |
一疗程
两疗程 |
100
97 |
3.5
7.0 |
4
7 |
100
93 |
3
5 |
6
6 |
>0.05
<0.05 |
生活能力
状态评级 |
一疗程
两疗程 |
100
98 |
1.0
1.5 |
1
2 |
99
92 |
1.0
1.0 |
1
2 |
>0.05
<0.05 |
血小板聚集率
血浆粘度
血球压积
纤维蛋白原
凝血酶原时间
胆固醇
甘油三酯 |
|
77
88
93
92
71
94
94 |
3.10
0.05
2.00
0.11
0
0.21
0.02 |
13.20
0.27
4.75
1.01
2
1.16
0.52 |
80
85
90
86
71
90
88 |
0.06
0.02
1.00
0.01
0
0.14
0.01 |
5.79
0.29
5.32
0.80
2
0.66
0.46 |
<0.05
>0.05
>0.05
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05 |
秩和检验
表8显示：一疗程治疗前后两组的神经功能缺损及生活能力状态评分的差值，无明显变化，P>O．05。两疗程治疗前后的神经功能缺损及生活能力状态评分的差值，试验组高于对照组，P<O．05。说明试验组的疗效优于对照组。血小板聚集率、纤维蛋白原治疗前后的差值，试验组大于对照组，并有显著性，P<O．05。而血浆粘度、血球压积、凝血酶原时间、胆固醇、甘油三酯治疗前后两组无显著性差异，P>0．05。
总之，通过二期第一阶段试验可见：蕲蛇酶注射治疗缺血性血管病疗效优于对照组，尤以两疗程疗效最佳，并可使血小板聚集率，纤维蛋白原含量下降。
三、第二阶段——开放试验
1．一般资料
开放试验共209例。男性139例(66．5％)，女性70例(33．5％)。平均年龄为63．33+9．31岁，轻型109例(52．2％)，中型76例(36．4％)，重型24例(11．5％)用药前病情在进展63例(30．1％)，停顿137例(65．6％)已好转9例(4．3％)。并发症平均评分：5．04±3．94分。既
往史平均评分：5．46±3．07分。
2．结果及其分析
结果见表9、表10
表9 开放试验209例治疗前后的比较
| |
|
n |
治疗前
X±5 |
治疗后
X±5 |
P |
神经功能缺
损程度积分 |
一疗程
两疗程 |
206
172 |
15．068±0．689
15．033±0．740 |
10．495±0．656
7．331±0．616 |
<0．05
<O．05 |
生活能力
状态评级 |
一疗程
两疗程 |
205
171 |
3．639±0．120
3．649±0．132 |
2．615±0．123
2．012±0．136 |
<0．05
<O．05 |
血小板
聚集率 |
一疗程
两疗程 |
74
173 |
38．543±2．400
36．507±1．620 |
34．712±2．107
30．027±1．462 |
<0．05
<0．05 |
血浆粘度
血球压积
纤维蛋白原
凝血酶原时间
凝血酶原活动度
胆固醇
甘油三酯 |
|
183
189
190
181
45
195
195 |
1．975±O．076
43．047±0．471
4．092±0．162
13．839±0．340
110．216±6．984
5．028±0．106
1．925±0．074 |
1．855±0．065
42．306±0．528
3．655±0．159
13．646±0．242
93．209±5．697
4．781±0．110
1．946±0．071 |
<0．05
>0．05
<0．05
>0．05
<0．05
<O．05
>0．05 |
由表9可见：临床神经功能缺损程度总积分及功能状态评级结果一、两疗程治疗后均优于治疗前，P<O．05，有显著性差异。旬小板聚集率、血浆粘度、纤维蛋白原、凝血酶原活动度、胆固醇治疗后均比治疗前低，P<O．05，有显著性差异。而血球压积、凝血酶原时间及甘油三酯治疗前后无显著性差异，P>O．05。
表10 开放试验209例一、两疗程的有效率
| |
一疗程
n |
一疗程
% |
两疗程
n |
两疗程
% |
| 基本痊愈 |
25 |
12.1 |
44 |
25.6 |
| 显著进步 |
60 |
29.1 |
79 |
45.9 |
| 进步 |
67 |
32.5 |
33 |
19.2 |
| 无效 |
53 |
25.7 |
16 |
9.3 |
| 恶化 |
1 |
0.5 |
0 |
0 |
由表10可见：开放试验209例经一疗程治疗，有效率(基本痊愈+进步+显著进步)为73．7％，而经过两疗程治疗后，有效率为90．7％。
总之，通过Ⅱ期第二阶段试验得出：蕲蛇酶注射液治疗缺血性脑梗塞是有效的，其有效率为90．7，并能降低血小板聚集率，血浆粘度、纤维蛋白原含量及凝血酶原活动度。
3．不良反应
(1)血小板降低：用药过程中部分病例有不同程度的血小板下降，低于6万／mm3者38例。所有病例无任何出血倾向，也未予任何治疗，停药后均自行回升，绝大多数病例于停药后2—4天恢复正常，仅一例回升较慢，28天恢复正常。
(2)过敏反应。6例出现皮疹，未经任何治疗于2—3天后皮疹消退。1例皮肤瘙痒。
(3)出血。一例出现牙龈小范围出血，一例出现全身皮肤散在小出血点，这两例均不伴有血小板降低，未经任何治疗自愈。发现4例梗塞后出血，均经头颅CT或MRI证实。这4例共同特点为：(1)临床病情无加重；(2)MRI或CT显示出血位于梗塞中心，量很小；(3)血小板下降不明显；(4)未发现其他器官有出血倾向。(5)未予特殊治疗，预后良好。
此4例影像学上表现梗塞后出血是与应用蕲蛇酶有关抑或为脑梗塞本身疾病进展所致，尚不能作出结论。
(四)蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗塞试验总结
蕲蛇酶Ⅱ期临床试验，共入选颈内动脉系统的急性脑梗塞409例。分两阶段进行，第一阶段为随机双盲安慰剂对照试验，共200例，其中对照组、试验组各100例，第二阶段为开放试验
209例。
试验采用的给药方法为：试验药或对照药lml溶于250—500ml生理盐水静脉点滴(3h以上滴完)，之后继续服用200mg维脑路通溶于500ml液体中静脉点滴，每日一次，7天为一疗程；停药5天后开始第二疗程。
试验结束后，根据扬州会议所规定的疗效评定标准，进行临床疗效统计，并观察该药对血
小板聚集率、血浆粘度、纤维蛋白原、红细胞压积、凝血酶原时间、凝血酶原活动度及血脂等有关化验指标的影响。
其结果表明：①试验组的疗效优于对照组，尤以两疗程的疗效最好。血小板聚集率、纤维蛋白原含量的下降幅度，试验组明显高于对照组。
②209例经蕲蛇酶治疗后，临床神经功能缺损及生活能力状态评级均得到明显改善，血小板聚集率、血浆粘度、纤维蛋白原含量、凝血酶原活动度也有显著下降。
Ⅱ期临床试验，309例两疗程治疗后，第一疗程基本痊愈11．8％，显著进步28．1％，进步31．7％，无效27．8％，恶化0．6％。一疗程总有效率(基本痊愈十显著进步+进步)为71．6％。两疗程基本痊愈24．9％，显著进步48．0％，进步19．3％，无效7．8％，无恶化。两疗程总有效率为92．2％。
在试验过程中，有部分病例出现血小板计数下降，这些血小板下降病例，并不伴有任何出血倾向，且很快自行回升。6例出现皮肤过敏。1例牙龄小范围出血，1例全身皮肤散在出血点，4例梗塞后出血(梗塞后出血量均很小)，以上所有病例未予特殊处理，症状均消退，预后均良好。
总之，Ⅱ期临床试验显示：蕲蛇酶是治疗急性脑梗塞病有效、安全的药物。
试验设计者：赵玉宾、李美琳、曹美英、慕容慎行、季晓林
试验负责者：赵玉宾、李美琳、曹美英、慕容慎行、季晓林
参 加
者：陈清棠、赵玉宾、赵桂萍、李美琳、曹美英、慕容慎行、许国英、季晓林、周秀珍
试验负责单位：北京医科大学第一医院
原始记录保存处：北京医科大学第一医院
联 系 人：赵玉宾
电 话：6031122转2363
试验日期：1994．6～1995．8 |